· polyacrylamidegel dia tsy maintsy amin'ny acrylamide monomer, polymerization manomboka fitaovana, catalyst, ary ny zo ny sira sy buffer mifangaro miaraka.
· acrylamideary ny BIS (N, N '- methylene double acrylamide) dia ny matrice gel endrika monomer.
· ammonium persulfate manomboka adhesive polymerization dingana.Ny famolavolana ny lakaoly dia mitaky vahaolana ammonium persulfate 10% voaomana ao anaty rano.Ny ankamaroan'ny fampahalalana dia nilaza fa ilaina ny fampiasana mavitrika.Na izany aza, ny vahaolana 10% dia azo apetraka amin'ny 4 ℃ mandritra ny herinandro maromaro tsy misy fatiantoka lehibe.Manaova hatramin'ny 10 ml ary ariana rehefa tsy mitambatra ny lakaoly.
Soso-kevitra: Ny isan-jaton'nyacrylamideamin`ny sequencing lakaoly sy proteinina lakaoly dia tsy mitovy.Raha mampiasa acrylamide efa vita: vahaolana BIS dia ataovy izay hahazoana ny tavoahangy mety.
· TEMED (N, N, N ', N '- tetramethyl ethylenediamine) dia catalyst, ao anaty tavoahangy volontany, napetraka ao anaty vata fampangatsiahana.Ampio alohan'ny handrarahana lakaoly.
· Ny electrophoresis polyacrylamide ampiasaina amin'ny fitaratra amin'ny electrophoresis dia tokony hosasana aloha sy aorian'ny fotoana tsirairay.Aorian'ny electrophoresis, sasao amin'ny borosy malefaka sy lamba amin'ny rano mafana misy savony, kobanina amin'ny rano voadio ary mijoro ho maina.
· Ny hamandoana sy ny vovoka dia mety miteraka polymère hollow.Alohan'ny electrophoresis, diovy ny lovia fitaratra amin'ny fitaratra madio ary mamafa azy amin'ny borosy malefaka.Sasao amin'ny rano voadio ary maina tsara amin'ny famafana taratasy.Ny fanasan-damba amin'ny ethanol 70% alohan'ny famafana amin'ny taratasy dia manampy amin'ny fanadiovana sy hanafaingana ny fanamainana.Asio santionany acrylamide misesy: BIS, rano, vahaolana buffer, ammonium persulfate, TEMED.Afangaro tsara ary arotsaka avy hatrany.
Tsy ilaina ny degass polyacrylamide alohan'ny polymerization.(Acrylamide dia napetraka tao anaty banga mba hanesorana ny bubbles satria manakana ny polymerization ny oksizenina.)
Torohevitra santionany amin'ny teboka lakaoly mitsivalana.
· Asio taratasy mainty ao anaty boaty ambany, afara mainty mba hanaovana lavaka santionany hahitana mazava kokoa.
· Fiarovana feno lakaoly, eo ambonin'ny colloid.
· Raha misy jiro ny sisiny, dia asio ny jiro, avelao ny hazavana hamirapiratra colloid.Soraty ao anaty pipette ny santionany.
· mampiasa fitaovana fametahana fantsona mandeha ho azy.
· amin'ny 10-200 mu 1 ranon-javatra mihetsika dia azo ampiasaina amin'ny ankamaroan'ny teboka eo amin'ny santionany.Ho an'ny lavaka santionany kely (latsaky ny 10μ1), ny lohan'ny pipette lava ampiasaina amin'ny fametahana lakaoly dia mety kokoa.
· Atsoboka ao anaty santionany fotsiny ny pipetting, mifoka ranon-javatra mihetsika tsikelikely.Ny santionany dia mety ho hita mipetaka miaraka amin'ny glycerine, ary ny paompy haingana dia mety hisintona rivotra ao amin'ny lohan'ny pipette.
· ny santionany rehefa avy nifoka lohan'ny pipetting, dia hamindra moramora eo amin'ny sisin'ny sodina ny lohan'ny ranon-javatra na ny taratasy famafana ny lohan'ny ranon-javatra ivelan'ny vongan-drano.Tandremo sao mitsentsitra ny santionany.
Apetraho ao anaty lavaka santionany ny santionany
· fitaovana fanaovana pipetting mba hihazonana tsindrim-peo kely, ataovy ny santionany hivezivezy kely ny lohan'ny rano.
· ny lohan'ny pipetting nampidirina tao amin'ny buffer, avo kely noho ny lavaka misy toerana, mitazona tsindry tsara.Ny tendron'ny pipette dia azo ampidirina ao anaty lavaka kely.
· mivoaka tsikelikely ny santionany.Apetraka eo ambonin'ilay lavaka santionany ny tendron'ny pipette, ary hilentika ao anaty lavaka ilay santionany.Avela hilentika ny santionany mba hamenoana ny lavaka santionany fa aza manindrona.
· Raha vao ny santionany indray mitete farany miaraka amin'ny loha misy ranon-javatra, dia hifindra any amin'ny tongotra faharoa ny ranon-javatra, hampiakatra tsikelikely ny fihetsehan'ny ranon-javatra, hiala amin'ny buffer
Ahoana ny fomba fanaovana sampling lakaoly mitsangana?
· misy lavaka santionan'ny lakaoly mitsangana miforona eo anelanelan'ny vera roa.Amin'ny lakaoly manify dia tsy azo ampidirina eo anelanelan'ny takelaka fitaratra roa ny lohan'ny pipette.Jereo ny glycerine!Apetraho eo ambonin'ny lavaka santionany ny lohan'ny pipette ary hilentika ao anaty lavaka ilay santionany.
· teboka santionany aloha, ho azo antoka ny hametraka ny mitsangana teboka polypropylene acyl gel santionany lavaka dia hosasana madio.Sasao ny acrylamide tsy misy polymer sy ny rano izay mety hiseho eo amin'ny farany ambany amin'ny lavaka santionany.Ny rano dia mety hahatonga ny lavaka santionany ho kely kokoa.Mampiasà syringe 25ml na 50ml ary fanjaitra 18 gauge.Arotsaho ny buffer electrophoresis ary esory tsara ny lavaka santionany.
· Mety ho sarotra ny mahita ny lavaka santionany, nefa mora ihany koa ny ambiny.Raha misy lavaka be loatra dia azo tsapaina amin'ny manga bromophenol ny buffer santionany.
Fotoana fandefasana: Mar-31-2023